本发明提供一种采用荧光定量PCR技术定量检测土壤中大肠杆菌O157:H7的方法,该方法包括(1)提取样本的微生物基因组DNA;(2)将所述基因组DNA放入PCR反应管中,并向管中加入正向引物、反向引物、SYBR Green Reaction Mix、ROX和无菌水,对标准对照液和未知样品同时进行PCR扩增和熔解曲线测定,获得大肠杆菌O157:H7实时定量PCR的Ct值,根据标准对照液的Ct值和拷贝数拟合的标准曲线,即可定量检测未知样品中的大肠杆菌O157:H7,特异性高,准确度强,最低检测DNA浓度为1.5×10‑4ng/μL,可有效解决土壤和粪便中大肠杆菌O157:H7定量检测的问题。
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